Método analítico para la detección y cuantificación de harmina en presencia de α-ciclodextrina sobre matriz de orina

PEDRO JOSÉ PEÑA HERNÁNDEZ; ALICIA VIVIANA VEGLIA

San Juan

Congreso; XII Congreso Argentino de Química Analítica- San Juan 2023; 2023

Asociación Argentina de Químicos Analíticos

La harmina (HNA) es un alcaloide fluorescente del tipo β-carbolina inhibidora de la enzima monoaminooxidasa que se encuentra presente en varias especies de plantas, principalmente en aquellas pertenecientes a los géneros Peganum, Passiflora y Banisteriopsis. Su uso terapéutico en el tratamiento del Alzheimer y el Parkinson ha sugerido efectos psicofarmacológicos positivos, así como mejorar la memoria y el aprendizaje. Sin embargo, una dosis excesiva de HNA puede causar toxicidad sobre el sistema nervioso y producir temblor, que estaría relacionado con el sistema de glutamato. En este sentido, se han reportado diversos casos de intoxicación por el consumo de la decocción conocida como “Ayahuasca”, un brebaje que contiene parte de la liana Banisteriopsis caapi como uno de sus componentes principales, detectando y cuantificando la presencia de HNA luego de su ingestión a través de distintas técnicas analíticas sobre matrices de sangre, orina, saliva o sudor. Esto motivó el estudio de la interacción supramolecular de este analito con α-ciclodextrina (αCD) mediante espectroscopía de Fluorescencia (F). Se observó un incremento en el área de F de HNA en presencia de concentraciones crecientes de αCD (hasta 1 mM), con una constante de asociación (KA) para el complejo HNA-αCD de (2,5 ± 0,9) x 10 3 M-1 (25,0 ºC y pH= 6,994) y una relación de rendimientos cuánticos de fluorescencia entre el analito complejado y el libre de (1,6 ± 0,3). Los límites de detección (LOD) y de cuantificación (LOQ) de la curva de calibrado de HNA con 1 mM de αCD fueron (1,56 ± 0,02) nM y (4,73 ± 0,05) nM, respectivamente. Se realizaron ensayos de recuperación (R) de la HNA en agua de canilla y en orina humana recolectada durante 24 h, empleando tres niveles diferentes de concentración y triplicados en cada caso. Se determinó una R del 97 % de HNA en muestras al 40 % de agua de canilla. Dadas las características ácido-básicas de la HNA (pKa = 7,6) la matriz de orina conservada a pH 2, se alcalinizó hasta pH = 9,00, se extrajo con éter etílico, evaporó y retomó en metanol. Con este procedimiento la R absoluta fue del 84 % y la R aparente fue del 103 % en soluciones conteniendo 2 % de extracto metanólico.La metodología aplicada demuestra de manera efectiva la recuperación del analito de interés al emplear una matriz compleja como la orina humana. Además, el LOD obtenido es comparable con los valores reportados utilizando otras técnicas analíticas. La F de sistemas supramoleculares se destaca como una opción ventajosa por su simplicidad y rapidez, con un equipamiento más económico y versátil.